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考纲要求1.酶活力测定的一般原理和方法。2.酶在食品制造和洗涤等方面的应用。3.制备和应用固相化酶。4.蛋白质的提取和分离。5.从生物材料中提取某些特定的成分。1.探究影响果胶酶催化作用因素的实验设计思路(1)在一恒定的pH下,设置一系列的温度梯度,探究温度对酶活性的影响。(2)在一恒定温度下,设置一系列的pH梯度,探究pH对酶活性的影响。(3)在恒定的温度和pH下,设置不同浓度的果胶酶,探究果胶酶的最佳用量。2.酶和酵母细胞常用的几种固定方式(1)是包埋法,是将酶或者细胞包埋在细微的网格里。(2)是化学结合法,是将酶或者细胞相互结合或者结合到载体上。(3)是物理吸附法,是将酶或者细胞吸附到载体表面。3.物质分离的5种方法(1)分离油水混合物:分液法。(2)除去固体物和残渣:过滤法。(3)除去液体中质量较小的固体残留物:离心法。(4)除去芳香油中的残留水分:加入无水硫酸钠后过滤。(5)除去萃取液中的有机溶剂:蒸馏法。要点整合1.果胶酶与纤维素酶的比较2.直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的比较3.固定化酵母细胞制备流程中的4个关键点(1)酵母细胞的活化:加入蒸馏水使酵母细胞从休眠状态重新恢复到正常的生活状态。此过程中酵母细胞体积增大,应选择容积足够大的容器,避免活化液溢出。(2)配制海藻酸钠溶液:宜采用小火或间断加热的方法以防其焦糊。(3)海藻酸钠溶液与酵母细胞混合:混合之前,海藻酸钠溶液要冷却至室温,然后加入已活化的酵母细胞并进行充分搅拌,混合均匀后,再转移至注射器中。(4)固定化酵母细胞:以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,将形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。要点整合1.三种植物成分的提取方法、提取原理及步骤的比较特别提醒(1)蒸馏装置中冷凝管内水流方向,应与蒸气流向相反。(2)压榨前,橘皮要用石灰水充分浸泡,以提高出油率,防止压榨时滑脱等。(3)胡萝卜素不溶于水,胡萝卜的含水量影响胡萝卜素的萃取效果。(4)萃取加热时,要选择水浴加热的方式;要加装冷凝回流装置,目的是防止加热时有机溶剂挥发。2.血红蛋白的提取(1)红细胞的洗涤①目的:去除杂蛋白。②方法:低速短时间离心,然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入五倍体积的生理盐水稀释,缓慢搅拌10min,再低速短时间离心,如此重复洗涤三次,直至上清液不再呈现黄色,表明红细胞已洗涤干净。(2)血红蛋白的释放加蒸馏水(作用是使红细胞吸水涨破)到原血液的体积,再加40%体积的甲苯(作用是溶解细胞膜),充分搅拌10min,红细胞破裂,释放出血红蛋白。(3)分离血红蛋白溶液①将搅拌好的混合液转移到离心管内,以r/min的速率离心10min后,试管中的溶液分为4层,血红蛋白的水溶液位于第3层。②将试管中的液体用滤纸过滤,除去脂溶性沉淀层,于分液漏斗中静置片刻后,分离出下层的红色透明液体,即血红蛋白溶液。3.三种分离蛋白质的方法比较(1)透析法:利用透析袋只允许小分子自由进出的原理,去除小分子杂质,可实现对血红蛋白的“粗分离”。(2)凝胶色谱法:相对分子质量较大的蛋白质先流出,相对分子质量较小的蛋白质后流出,依此可对血红蛋白进行分离和纯化。(3)电泳法:利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。来源网络,本平台整理发布,如侵权,请联系删除

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